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Producción de anticuerpos frente a la nisina A : estrategias de inmunización y desarrollo de inmunoensayos

Suárez Gea, Ana María (2003) Producción de anticuerpos frente a la nisina A : estrategias de inmunización y desarrollo de inmunoensayos. Tesis PhD.

Official URL: http://eprints.ucm.es/tesis/19972000/D/2/D2024001.pdf

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Abstract

En el presente trabajo se describe la obtención de anticuerpos policlonales y monoclonales frente a la nisina A, una bacteriocina producida por algunas cepas de Lactococcus lactis subsp. lactis. Para la obtención de anticuerpos policlonales, la nisina se conjugó a dos moléculas portadoras, la toxina colérica y la hemocianina de Megathura crenulata (KLH) y se inmunizaron ratones Balb/c por vía intraperitoneal y subcutánea. El conjugado de nisina A con KLH, inoculado por vía subcutánea, originó la respuesta inmune más potente y específica.
Con estos anticuerpos se ha desarrollado un método inmunoenzimático (ELISA) de tipo competitivo directo que permite detectar niveles de nisina de hasta 5 ng/ml. También se han obtenido anticuerpos monoclonales frente a la nisina A a partir de dos fusiones celulares que originaron dos hibridomas productores de anticuerpos específicos. Con estos anticuerpos monoclonales también se han desarrollado ensayos inmunoenzimáticos de tipo competitivo directo, alcanzando un límite de detección de 1 ng/ml. Los anticuerpos policlonales y monoclonales obtenidos y los inmunoensayos desarrollados, se han empleado para evaluar la producción de nisina de un cultivo de L. lactis a lo largo de su crecimiento, para detectar la nisina presente en alimentos y para construir una columna de cromatografía de inmunoafinidad que permita purificar este compuesto de una manera sencilla y en un sólo paso.

Item Type:Thesis (PhD)
Additional Information:Tesis de la Universidad Complutense de Madrid, Facultad de Veterinaria, Departamento de Nutrición, Bromatología y Tecnología de los Alimentos, leída el 26-11-1997
Directors:
DirectorsDirector email
Azcona Olivera, Juan IgnacioUNSPECIFIED
Sanz Pérez, BernabéUNSPECIFIED
Hernández Cruza, Pablo ElpidioUNSPECIFIED
Uncontrolled Keywords:Inmunoglobulinas Ratones Experimentación biológica y médica
Subjects:Medical sciences > Veterinary > Veterinary immunology
Medical sciences > Veterinary > Laboratory animals
ID Code:3053
Deposited On:25 Oct 2004
Last Modified:30 Oct 2011 10:37

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