Biblioteca de la Universidad Complutense de Madrid

Contribución de los triptófanos a la estructura y funcionalidad de la ribotoxina [alfa]-sarcina

Impacto



Antonio Pérez, María del Carmen de (2004) Contribución de los triptófanos a la estructura y funcionalidad de la ribotoxina [alfa]-sarcina. [Tesis Doctoral]

URL Oficial: http://eprints.ucm.es/tesis/bio/ucm-t26222.pdf



Resumen

La alfa-sarcina es una citotxina secretada por Aspergillus giganteus que contiene dos triptófanos conservados en las posiciones 4 y 51. Se han preparado dos mutantes individuales, sustituyendo cada residuo por una Phe. Los dos mutantes individuales, y el doble, se han producido, aislado y purificado. Además, se han caracterizado estructural y enzimáticamente, y se ha estudiado su capacidad para interaccionar con vesículas de fosfolípidos. De acuerdo con los resultados, ninguno de los dos triptófanos es necesario para que la enzima tenga su actividad ribonucleolítica específica frente a los ribosomas. La resonancia magnética nuclear de protón revela que la estructura global de la enzima se mantiene tras las mutaciones. Ello ha permitido evaluar la contribución individual de cada uno de los Trp a los espectros de dicroísmo circular y de emisión de fluorescencia de la proteína. La termoestabilidad de los mutantes, por el contrario, sí es menor. En cuanto al estudio de la interacción con los lípidos, se ha puesto de manifiesto que al unirse a las membranas se destabiliza la proteína. Sin embargo, no cambia su patrón de interacción con vesículas modelo compuestas por fosfolípidos ácidos, en términos de agregación de las mismas, mezcla de lípidos o pérdida de contenidos acuosos. Todos estos estudios han permitido definir, tras la interacción de los mutantes purificados con vesículas lipídicas en las que se había incorporado antraceno, que el Trp-51 se incorpora a la región hidrofóbica de la bicapa. Este resultado indica que la región que rodea a este residuo se localiza en el núcleo hidrofóbico de la proteína que es responsable de su capacidad para atravesar membranas


Tipo de documento:Tesis Doctoral
Información Adicional:

Tesis de la Universidad Complutense de Madrid, Facultad de Ciencias Biológicas, Departamento de Bioquímica y Biología Molecular I, leída el 26-11-2002

Directores (o tutores):
NombreEmail del director (o tutor)
Martínez del Pozo, Álvaro
Manchego Gómez, José Miguel
Palabras clave:Ribosomas Triptófano
Materias:Ciencias Biomédicas > Biología > Biología molecular
Código ID:4470
Depositado:17 May 2005
Última Modificación:30 Oct 2011 10:37

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