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Interacciones entre ácido desoxirribonucleico y la membrana plasmática durante el estado de competencia de Bacillus subtilis

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2015
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Universidad Complutense de Madrid
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A medida que el campo de la Genetica Molecular se ha ido desarrollando, ha ido ganando en importancia el papel que los mecanismos de intercambio de material genético entre los seres vivos juega en todos los procesos vitales. Uno de estos mecanismos, la transformación bacteriana, constituye la forma más directa de abordar la problemática de la transmisión de información genética, puesto que estudia la interacción entre moléculas de DNA purificados y microorganismos receptores. Los mecanismos implicados en tales interacciones son lo suficientemente desconocidos como para que atrajera nuestra atención, dado que plantean los interrogantes de cómo y por qué el DNA transformante es incorporado por las células de un cultivo bacteriano. Por ello, una vez actualizado el tema después de una documentada labor de recopilación bibliográfica, se centró la problemática en el estudio de las primeras etapas del proceso de transformación bacteriana. Después de establecer las condiciones óptimas para nuestro trabajo experimental introduciendo modificaciones en el método de desarrollo de la competencia. Hemos estudiado la influencia de diversos cationes divalentes en la competencia y en el proceso de la transformación. Asimismo hemos estudiado el efecto del EDTA en la transformación, comprobando que produce una alteración irreversible de los receptores específicos del DNA, tanto en células como en protoplastos y vesículas membranosas. Por otra parte, hemos investigado la influencia del magnesio en las interacciones DNA-membrana citoplásmica, tanto in vivo como in vitro. Este estudio nos ha llevado a establecer un sistema experimental, mediante la eliminación del magnesio, que nos ha permitido separar la fase de unión del DNA exógeno, de la penetración. Finalmente hemos realizado un estudio comparativo de las interacciones DNA-membrana en células, protoplastos y vesículas membranosas empleando DNAs homólogo y heterólogos de los fagos de Escherichia coli T4 y T*4. Estas investigaciones parecen indicar la existencia de dos tipos de receptores del DNA en células competentes. El primer tipo de receptores sólo puede ser dectectado en protoplastos y vesículas. Los DNAs de los fagos T*4 y T4 presentan igual afinidad por los dos tipos de receptores, mientras que el DNA de B. subtilis posee mayor afinidad por el primer tipo de receptores.
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Tesis inédita de la Universidad Complutense de Madrid, Facultad de Ciencias Biológicas, leída en 1978.
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