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Valoración no invasiva de la gestación y la embriogénesis en ratón mediante técnicas de imagen ultrasonográfica

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2009-01-15
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Universidad Complutense de Madrid, Servicio de Publicaciones
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El ratón es el animal de laboratorio más utilizado en investigación, por poseer unas características peculiares como son su pequeño tamaño, fácil manejo, corto ciclo reproductivo y vital y, muy especialmente, su facilidad de manipulación genética, que han hecho de él un modelo único en el estudio de muchas enfermedades del hombre.Conseguir un adecuado manejo reproductivo que incluya un diagnóstico precoz de gestación resulta de gran interés para la gestión de una colonia, para el diseño de grupos experimentales homogéneos y para reducir el número de animales, evitando sacrificios innecesarios y permitiendo la reutilización de hembras no gestantes. En humana y en otras especies animales, el diagnóstico de gestación se realiza habitualmente por métodos directos basados en la Ultrasonografía (US), que ofrecen como ventaja la posibilidad de un estudio dinámico en tiempo real, con períodos de examen cortos, sin efectos secundarios y a un coste relativamente asequible. Con la US, además de diagnosticar la gestación, es posible determinar el número de fetos y su viabilidad. Por ser una técnica no invasiva, permite elaborar observaciones secuenciales a lo largo de la gestación, resultando muy útil para estudios de desarrollo y realización de fetometría.El objetivo general del desarrollo experimental de esta Tesis Doctoral fue la puesta a punto de la técnica de ultrasonografía para el estudio de la gestación en ratón y la valoración de sus posibilidades de aplicación práctica, tanto en manejo como experimentación. Para ello, se desarrollaron tres objetivos específicos: el primer objetivo buscaba estimar la utilidad de la ultrasonografía convencional, con frecuencias de 7,5 a 10 MHZ, para el diagnóstico precoz de la gestación, la determinación del número de embriones y el seguimiento del desarrollo embrionario en ratón, con el fin de reemplazar otros procedimientos tradicionalmente usados e incrementar la eficiencia en el manejo de este animal de laboratorio. Para alcanzar este objetivo, se llevaron a cabo dos experimentos. En el segundo objetivo buscaba determinar la utilidad de la ultrasonografía convencional para la valoración de alteraciones en el desarrollo embrionario (retrasos en el crecimiento y/o mortalidad) en cepas modificadas genéticamente y que presentan problemas reproductivos.Para el estudio de este objetivo se llevaron a cabos dos experimentos y con el tercer objetivo se buscaba valorar la utilidad de la ultrasonografía con frecuencias de 40 MHZ (ultrasonografía biomicroscópica o UBM) para la caracterización in vivo de la embriogénesis en el ratón. En este objetivo se llevo a cabo un experimento observando con UBM los cambios fenotípicos del embrión.[ABSTRACT]The mouse is the laboratory animal most widely used for research purposes, due to some special characteristics like small size, easy management, short reproductive and life cycles, and, specially, its potential for genetic manipulation, which makes some mice strains exceptional models for the study of human diseases. Thus, the achievement of an adequate reproductive management including an early pregnancy diagnosis is very interesting both for running the animal facilities and designing experimental groups with adequate number of animals, avoiding unnecessary sacrifices of non-pregnant females. In human and other animal species, pregnancy diagnosis is routinely performed by direct methods based on ultrasound imaging (US), which offers the possibility of dynamic real-time studies, in short observational period, without secondary effects and at reasonable cost. By using US, besides pregnancy diagnosis, it is also possible to determine the number and viability of the embryos. US, being a non-invasive technique, allows sequential observations in successive days during pregnancy, which is very useful for developmental and fetometric studies. Thus, the general objective of current Thesis was the incorporation and validation of ultrasonography for pregnancy observation in the mouse and evaluation of its use in practice, either for management or research.
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Tesis de la Universidad Complutense de Madrid, Facultad de Veterinaria, Departamento de Producción Animal leída el 13-06-2008
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