Publication: Caracterización estructural de la proteína modular CbpF de "Streptococcus pneumoniae": aplicación de complejos de Gd para la obtención de fases en cristalografía macromolecular
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Publication Date
2010-06-11
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Universidad Complutense de Madrid, Servicio de Publicaciones
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Abstract
Neumococo, responsable de un elevado número de procesos infecciosos e invasivos severos en humanos, es el único microorganismo conocido que presenta un requerimiento nutricional absoluto por colina. Este aminoalcohol es incorporado en forma de fosforilcolina a los ácidos
(lipo)teicoicos que forman parte de la envuelta celular y desempeña un papel fundamental en la fisiología y la patogenicidad de neumococo mediante su unión a los componentes séricos del sistema inmune y actuando como punto de anclaje para la familia de proteínas de superficie de unión a colina (CBPs). En este contexto, es interesante el estudio estructural y funcional de la proteína CbpF, máxime teniendo en cuenta que se trata de una de las proteínas más abundantes en la pared celular de neumococo. Además cabe destacar que, a la dificultad de la
cristalización de proteínas modulares, debemos sumar la inexistencia de información alguna respecto a la funcionalidad de la proteína objeto de estudio.
De forma paralela, y empleando a la proteína CbpF como modelo, se abordó un estudio metodológico con una serie de complejos novedosos de Gd. Tras la producción de la proteína
pura y estable, de las diferentes etapas que transcurren de la proteína a la estructura, las etapas críticas son la cristalización y la obtención de cristales derivados que permitan determinar las fases experimentales. Es esta última etapa del proceso en la que nos centramos y más
concretamente en la obtención de cristales derivados para los métodos de obtención de fases que emplean la dispersión anómala. En definitiva, el objetivo es aportar una herramienta eficaz para obtener cristales derivados como alternativa de otros métodos bien establecidos.
Description
Tesis de la Universidad Complutense de Madrid, Facultad de Ciencias Químicas, Departamento de Bioquímica y Biología Molecular I, leída el 11-09-2009