Publication: Seguimiento de la infección por el virus de maedivisna en una explotación de ganado ovino
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2005-02-21
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La enfermedad de Maedi-Visna está producida por el retrovirus homónimo (MVV), muy similar en todas sus características al que produce la artritis-encefalitis-caprina (CAEV). Ambas enfermedades son de distribución mundial y se caracterizan por cuadros clínicos parecidos, afectando a distintos sistemas, aunque algunos se pre-sentan con más frecuencia en ovejas y otros en cabras. Una de las observaciones más habituales es la presencia de virus en mamas, y aunque puede cursar sin alteraciones clínicas, en ocasiones puede desencadenar mamitis clínicas o subclínicas. En el presente estudio se analizó la infección por MVV en una explotación de ganado ovino de la Co-munidad de Castilla La Mancha, realizando cinco muestreos de sangre y de leche en los mismos 50 animales, aproximadamente cada dos meses y medio. Los objetivos eran comparar métodos serológicos (ELISA) y virológicos (PCR), estudiar la evolución de la infección y de la respuesta inmune humoral a lo largo del tiempo, sus repercusiones so-bre la producción láctea, y analizar posibles diferencias entre aislados víricos de sangre y leche dentro del mismo animal, a lo largo del tiempo y en diferentes animales.
La prevalencia inicial fue del 64% y la final del 76%, por lo que la infección se había transmitido eficazmente en la población estudiada. Sin embargo, los resultados habidos por PCR (empleando una técnica que amplifica un fragmento muy conservado en pol) y por ELISA (utilizando ELITEST comercial) fueron muy dispares, observán-dose una gran falta de concordancia. También se observó falta de concordancia entre los resultados obtenidos de leche y de sangre para cada animal y cada toma. De hecho, los valores kappa globales y desglosados por tomas fueron muy débiles (0,10-0,23). Esto puede deberse a que a) los animales tarden mucho tiempo, incluso años en seroconver-tir; b) la técnica ELISA empleada no detecte todas las inmunoglobulinas en leche (o no detecte bien); o c) el pequeño número de células infectadas presentes en las muestras de leche en diferentes momentos del estudio.
Una interpretación “beneficiosa” de la falta de concordancia entre los resultados serológicos y los de PCR podría ser que tras la infección vírica se produzca una fuerte respuesta inmune humoral que limite la detección del virus. Sin embargo, este no fue el caso porque en varias ocasiones se detectó ADN proviral tanto en animales que nunca seroconvirtieron (indicando baja inmunogenicidad del virus), como en otros que sí pre-sentaron anticuerpos frente a MVV. Además, la detección de ADN proviral mediante PCR no fue constante en un animal dado a lo largo del tiempo. Todas estas observacio-nes sugieren que el virus pueda estar experimentando mutaciones tras ser detectado ini-cialmente por el sistema inmune, que le permitan escapar de él. Intentamos responder a esta posibilidad secuenciando los fragmentos amplificados por PCR. Sin embargo, dado que habíamos elegido una región conservada del genoma vírico, y al bajo número de se-cuencias que hemos concluido, no podemos confirmar la hipótesis por el momento. Da-do que la respuesta inmune humoral no es eficaz cabe pensar que la infección esté más o menos controlada por la respuesta inmune celular.
Finalmente, a lo largo de nuestro estudio se observó la posible relación entre la mamitis subclínica y la infección por MVV en animales PCR positivos pero ELISA ne-gativos. Este hecho reforzaría la teoría de que se produce una respuesta celular tan fuer-te y temprana que posiblemente destruiría las células infectadas con MVV presentes en la glándula mamaria. De este modo aumentarían el número de células en leche, favore-ciendo la detección de la mamitis subclínica por el test de mamitis de California. //
FOLLOW-UP OF THE INFECTION BY MAEDI-VISNA VIRUS IN A SHEEP FARM
AUTHORS: Nieves Perdigones, Esperanza Gómez-Lucía, Ana Doménech
Maedi-Visna disease is produced by a retrovirus, MVV, very similar in all its characteristics to the one that produces caprine-arthritis encephalitis (CAEV). Both dis-eases are worldwide and are characterised by similar clinical signs, affecting different systems, though some are more frequent in sheep and others in goats. One of the most frequent findings is the presence of virus in the mammary glands, and though it may oc-cur without clinical manifestations, some other times it may spark clinical or subclinical mastitis. In the present study, the infection by MVV was evaluated in a sheep farm in the Comunidad de Castilla La Mancha, by sampling a group of 50 animals five times throughout a year, approximately every 2.5 months. The aims of the study were to com-pare serological (ELISA) with virological (PCR) methods, study the evolution of the in-fection and of the humoral immune response during this period, its effects over milk yield, and analyse the possible differences between viral isolates in blood and milk in the same animal, throughout time, and in different animals.
Initial prevalence was 64% and at final prevalence 76%; it was inferred that the infection had been efficiently transmitted in the population under study. However, re-sults obtained by PCR (using a technique that amplifies a very conserved fragment in the pol region) and by ELISA (using the commercial ELITEST) were very variable, with a high degree of discordance. Results obtained from milk and blood for each ani-mal and in each sampling were also discordant. In fact, the global and individual kappa values were very low (0.10-0.23). Possible explanations are a) that animals may take long, even years, to seroconvert; b) the ELISA technique used did not detect (or de-tected poorly) all the immunoglobulins in milk; or c) the low number of infected cells present in milk samples in the different moments of the study.
A “beneficial” interpretation of the discordance between serological and PCR results may be that the immune response is very efficient and that after the viral infec-tion a strong humoral response initiates which restricts viral detection. However, this was not the case, as in several occasions proviral DNA was detected in animals that never seroconverted (suggesting a low viral immunogenicity), and in others that did present antibodies against MVV. In addition, proviral DNA detection by PCR was not constant in a given animal throughout time. All these results suggest that the virus might be experiencing mutations after its initial detection by the immune system, allowing the virus to escape. We attempted to answer this possibility by sequencing the fragments amplified by PCR. However, as we chose a conserved region in the viral genome, and we concluded few sequences, at the present moment we cannot confirm this hypothesis. As the humoral immune response appears not to be efficient it is reasonable to think that the infection is more or less controlled by the cell mediated immunity.
Finally, in our study we observed a possible relationship between subclinical mastitis and MVV infection in PCR positive but ELISA negative animals. This fact would reinforce the theory that there is such a strong and early cellular reaction that it would possibly destroy the cells infected by MVV present in the mammary gland. This way, the number of cells in milk would increase, allowing the detection of subclinical mastitis by California mastitis test.