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Characterization of two transcriptional activators: MafR of Enterococcus faecalis and MgaP of Streptococcus pneumoniae

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2021-05-10
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Universidad Complutense de Madrid
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The Gram-positive bacteria Enterococcus faecalis and Streptococcus pneumoniae are inhabitants of the human body. Whereas E. faecalis is a usual commensal of the gastrointestinal tract, S. pneumoniae is normally found in the nasopharynx of healthy individuals. Nevertheless, their ability to adapt to diverse stress conditions allows them to invade other niches of the human host causing a variety of life-threatening infections. In general, bacterial adaptation to new niches requires the action of proteins that act as global transcriptional regulators. These proteins activate and/or repress the transcription of multiple genes in response to specific signals. The Mga/AtxA family of global transcriptional regulators includes various proteins of Gram-positive pathogenic bacteria: AtxA (Bacillus anthracis), Mga (S. pyogenes), MgaSpn (S. pneumoniae), and MafR (E. faecalis). Several studies have shown that these transcriptional regulators play a role in bacterial virulence (Fouet, 2010; Hemsley et al., 2003; McIver, 2009; Ruiz-Cruz et al., 2016). MafR from Enterococcus faecalis: Previous studies in our laboratory showed that the MafR protein of E. faecalis strain V583 (MafRV583) binds to linear DNA fragments generating multimeric complexes, and this binding has little or no sequence specificity (Ruiz-Cruz, 2015). Furthermore, using microarrays designed for strain OG1RF, it was shown that MafR activates, directly or indirectly, the transcription of at least 87 genes. Many of them are organized in operons and encode proteins involved in the utilization of carbon sources (Ruiz-Cruz et al., 2016). In this Thesis, we have worked on the following objectives: (a) Analysis of the DNA-binding properties of MafR from strain OG1RF (MafROG1RF) and (b) Identification of genes regulated directly by MafROG1RF...
Las bacterias Gram-positivas Enterococcus faecalis y Streptococcus pneumoniae son habitantes naturales del ser humano. E. faecalis es un comensal del tracto gastrointestinal, mientras que S. pneumoniae puede encontrarse en la nasofaringe de individuos sanos. Sin embargo, su capacidad de adaptación a condiciones adversas les permite colonizar otros nichos y causar infecciones graves. En general, estos procesos de adaptación requieren la acción de proteínas que actúan como reguladores globales de la transcripción. Estas proteínas activan y/o reprimen la transcripción de numerosos genes en respuesta a señales ambientales específicas. La familia de reguladores globales conocida como Mga/AtxA incluye varias proteínas de bacterias patógenas Gram-positivas: AtxA (Bacillus anthracis), Mga (S. pyogenes), MgaSpn (S. pneumoniae) y MafR (E. faecalis). Varios estudios indican que estos reguladores transcripcionales están involucrados en la virulencia de estas bacterias (Fouet, 2010; Hemsley et al., 2003; McIver, 2009; Ruiz-Cruz et al., 2016). MafR de Enterococcus faecalis: Estudios previos de nuestro laboratorio mostraron que la proteína MafR de E. faecalis V583 (MafRV583) se une a fragmentos de ADN lineal generando complejos multiméricos y que esta unión tiene poca o ninguna especificidad de secuencia (Ruiz-Cruz, 2015). Además, mediante microarrays diseñados para la estirpe OG1RF, se observó que MafR activa, directa o indirectamente, la transcripción de al menos 87 genes. Muchos de estos genes están organizados en operones y codifican proteínas implicadas en la utilización de fuentes de carbono (Ruiz-Cruz et al., 2016). En esta Tesis, hemos trabajado en los siguientes objetivos: (a) Análisis de las propiedades de unión a ADN de la proteína MafR de la estirpe OG1RF (MafROG1RF) y (b) Identificación de genes regulados directamente por MafROG1RF...
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Tesis inédita de la Universidad Complutense de Madrid, Facultad de Ciencias Biológicas, leída el 03/12/2020
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